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本试剂盒采用简单步骤即可快速提取细菌脂多糖，提取产量高，省时，蛋白质和核酸污染低。


脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分，结构很复杂、热稳定性极高（在250℃下干热灭菌2h才完全灭活）。受LPS发现的历史原因，如今LPS的概念几乎等同于内毒素（endotoxin）。LPS由多糖链和脂质A组成，不同细菌间的多糖链是高度变化的，决定细菌的血清型；而脂质A主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动，包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。

由于LPS与机体免疫机能的密切关系，生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究，如阐明LPS的结构，代谢，免疫学，生理学，毒性，生物合成途径；诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌；诱导疾病研究的动物模型如炎症反应，急性肺损伤。

组分	50T	100T
试剂A：试剂A	50mL	100mL
试剂B：提取液B	25mL	50mL
试剂C：提取液C	25mL	50mL

保存：2～8℃，有效期1年。

• 适用性广，能从所有革兰氏阴性菌中提取LPS。
  
• 操作简单方便。
  
• 提取LPS下游应用广，包括直接用于免疫刺激。

离心机、振荡器、移液器、涡旋混匀器

• 离心机转速有相对离心力（RCF，×g）和每分钟转速（RPM）两种表示方式，有些离心机设置有RPM和×g显示切换，但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算：
  g=r×1.118×10^-5×rpm²（r为有效离心半径，即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度，单位为厘米）例如：转速为3000rpm，有效离心半径为10cm，则相对离心力（RCF，×g）为=10×1.118×10^-5×3000²=1006.2（×g）。
  
• 可以用试剂盒或者苯酚硫酸法进行脂多糖定量。

• 室温8000×g离心3分钟收获细菌细胞。
  
• 加入500μL试剂A重悬细菌，8000×g离心3分钟，弃上清。
  注：每次处理50mg～200mg湿重菌体均可。
  
• 收集沉淀，加入500μL试剂A重悬沉淀，8000×g离心3分钟，弃上清。
  
• 收集沉淀，加入500μL提取液B重悬沉淀。
  
• 在150w-300w超声10秒间隔10秒，超声5～15分钟。
  注：
  ● 没有超声条件可以不超声。
  ● 如果超声时出现黑色沉淀，说明超声功率过大，需要降低功率。
  ● 避免产生泡沫。
  
• 在10000×g离心10分钟取上清。
  
• 上清中加入500μL提取液C，剧烈涡旋20秒充分混匀。
  
• 在66～68℃水浴或气浴孵育30分钟。中间隔10分钟用移液器轻轻吹打混匀。
  
• 置4℃静置过夜。
  注：急用的样本可以将4℃静置时间缩短至2小时。
  
• 在4℃，3000×g离心20分钟。
  
• 取最上层上清至另一干净离心管，即得脂多糖样品。
  注：样品中含有盐。如果有需要可以透析或超滤脱盐后再用于下游实验。

相关搜索：细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒，细菌脂多糖提取试剂盒，Bacterial lipopolysaccharide(LPS)Extraction Kit